2016锡马将全程和半程项目的终点分置两处。赛道线路较15年有部分调整，并重新开启了江南大学赛段，将半程项目终点设立在江南大学内，这也将弥补参赛选手对于15年未加入江南大学赛段的遗憾。
2016锡马继续打造这一占据地域优势和特色的马拉松赛道，让参赛选手在跑马过程中收获美景，感受江南三月里春色的妖娆妩媚。在2015年无锡国际马拉松赛在赛道中为选手营造了美景加美人的绝美画面，给参赛选手留下了深刻的印象
起点：太湖大道隐秀路口-百米高喷左转-环湖路-环湖路双虹路口折返-环湖路-渤公岛-十里芳堤-鼋渚路-山水东路-具区路-缘溪道-清源路-清源路山水东路口折返-清源路-状元路折返-清源路-缘溪道-高浪路长广溪桥-山水东路-双虹桥-双虹路-隐秀路-太湖大道（终点）
2016年无锡马拉松比赛路线之半程
起点：太湖大道隐秀路口-百米高喷左转-环湖路-环湖路双虹路口折返-环湖路-渤公岛-十里芳堤-鼋渚路-双虹桥-双虹路-隐秀路-望湖路-鸿桥路-鸿桥路太湖大道路口-鸿桥路-望山路-隐秀路-太湖大道
起点：太湖大道隐秀路口-百米高喷左转-环湖路-蠡湖中央公园
以上就是2016年无锡马拉松比赛路线，需要注意的是在起点、每5公里点、折返点和终点设有计时地毯，选手在跑进过程中，均必须通过所有的地面计时地毯。在关门时间内完成比赛但缺少任何一个计时点的成绩，将不予排名。
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